产品名称：无外泌体血清（Exosome-depleted FBS，ExoDP-FBS）

体积：50 ml

保存条件：-20℃
保存期限：12个月
运输条件：干冰
用途：适用外泌体研究，该产品仅供科研使用
特点：无支原体，无内毒素，高纯度

无外泌体血清
1. 产品概述
    大多数细胞的生长所需的标准培养基，都需要添加胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）作为其生长所需补充物。但是，FBS来源于牛血清，其中天然含有大量的包括外泌体（exosome）在内的外源性细胞外囊泡（extracellular vesicles）。在对细胞标准化培养，进行细胞分泌的外泌体等相关研究时，血清中所含的外泌体会对研究结果产生巨大的干扰效果。
无外泌体血清（ExoDP-FBS）可以完全满足外泌体研究中对细胞培养条件的要求。本产品采用国外原装进口高品质胎牛血清为源血清，经过特定方法处理后，血清中的外泌体去除率达到98%以上。经过细胞生长实验验证，含ExoDP-FBS的培养基支持绝大多数细胞的生长。与含正常源血清（Source FBS）的培养基相比，其对细胞的生长和存活都具有同等甚至更好的促进作用。本产品与美国某品牌B实验数据相比，也具有更优的数据指标。使用本产品，将极大的减少科研中外源性背景信号，分离出高纯度的细胞分泌的外泌体，并且完全减去因自制无外泌体血清而耗费的时间以及各种不确定因素，从而从源头上排除实验过程中所出现问题的可能质疑，使研究时间和精力集中于解决科研难题。
 
2. 血清中外泌体的纳米粒子跟踪分析（Nanoparticle Tracking Analysis，NTA）
正常源血清与ExoDP-FBS分别先经过0.22μm针式过滤器过滤（Millipore），然后通过贝克曼超速离心机（Beckman Coulter Optima XPN）超速离心，所获沉淀以磷酸缓冲液（PBS）pH7.2重悬备用。Nanosight v.2.3 （Malvern Instruments）进行NTA分析。
本公司产品ExoDP-FBS与美国某品牌B产品（Brand “B” FBS）的外泌体NTA分析对比，本公司产品所采用的进口高品质源胎牛血清中总粒子数本底含量更低，ExoDP-FBS中总粒子绝对残留量更少，并且总粒子和外泌体（本说明书中定义为粒子直径35nm-155nm）去除率也非常高，分别达到98.78%和98.77%。各项指标均优于某品牌B实验数据。

3. ExoDP-FBS促进细胞的生长和存活
实验证明含ExoDP-FBS血清的培养基与含正常源血清的培养基相比，其对细胞的生长和存活都具有同等甚至更好的促进作用，而与无血清培养基相比则显著促进细胞的增殖及存活（图2）。细胞形态在含正常源血清和无外泌体血清的培养中无差异（图3）。因此，ExoDP-FBS完全可以满足外泌体研究中对细胞培养条件的要求。
本说明书中实验所用培养基分别为添加10%正常源血清（Source FBS）、10%无外泌体血清（ExoDP-FBS）和无血清（FBS free）培养基。人非小细胞肺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3均以2.0 x 105细胞/孔的密度种板（Day 1），在37℃，5% CO2标准培养条件下连续培养3天。种板72小时之后（Day 4），以台酚蓝染色法进行活细胞计数。同时，细胞进行传代培养，每组细胞同样以2.0 x 105细胞/孔的密度再次种板（Day 4 passage）。继续培养3天之后（Day 7），再次以台酚蓝染色法计数。在细胞种板一天（Day 2）、三天（Day 4）和六天（Day 7）后进行拍照，观察细胞形态。