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试剂耗材

极敏型 ECL化学发光底物试剂盒

产品介绍【返回】

品牌: 炎熙
货号: ECL-F-100/500
供应商: 上海觅拓
规格: ECL-F-100/ECL-F-500
规格: ECL-F-100 产品价格: ¥328.0
规格: ECL-F-500 产品价格: ¥1288.0
试剂盒组成:
货号 组份 数量 价格
ECL-F-100 A 液 50mL 328元
B 液 50mL
说明书 1 份
ECL-F-500 A 液 250mL 1288元
B 液 250mL
说明书 1 份
 
 
储存:建议置于4 ºC避光保存,一年稳定。
 
一、产品简介
本试剂盒是非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白或核酸,灵敏度高,背景低,最低检测灵敏度可达低飞克(femtogram)级乃至飞克级以下,适用于检测极痕量蛋白或核酸。发光信号持续时间较长,半小时以后仍可维持75%的发光,便于反复曝光操作。与其他 ECL 化学发光底物相比,可显著减少样本及一抗和二抗的使用量。
 
二、原理:
极敏型ECL化学发光底物试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体、抗原或者核酸。蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以HRP标记的抗体或探针结合膜上的目的蛋白或核酸,洗膜后置于本产品配制的ECL工作液中,室温孵育数分钟,HRP使工作液中的鲁米诺(Luminol)氧化并发光,试剂中添加的增强配方可以使这种发光得到极大增强,从而能够检测更少量的蛋白质或核酸。此光经X光胶片或者电子装置感光记录下来,可清晰显示蛋白质或核酸条带。
 
三、产品优点:
低飞克级灵敏度——极高的灵敏度,能快速检测更广泛的蛋白范围,最低可检测飞克(femtogram)级以下的蛋白。
信号稳定——发光时间较长,能进行多次曝光,半小时以后仍可维持75%的发光。
信号强——发光信号比对碘苯酚增强的 HRP-鲁米诺检测体系得到极大增强。
稳定性较高——试剂盒可在4度稳定存放一年。
节约抗体——需要更少(稀释更多)的一抗和二抗,特别节省抗体(推荐用量:一抗0.01-0.2μg/mL,二抗2-10ng/mL)。
 
四、使用方法:
1. 印迹膜制备:执行常规电泳、转膜、HRP标记的抗体或者HRP标记的核酸探针孵育、洗膜;ECL工作液含有HRP催化的发光底物,检测系统必须基于HRP酶标记的抗体或者核酸探针。充分的洗涤对于降低背景非常重要,所有步骤均在室温下完成。
2. ECL工作液的配置:在使用前取等量A液和B液,混合均匀并尽快使用;将膜片置混合液中,于室温下孵育约2分钟,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆盖全膜片,注意不要在膜片表面形成气泡。
3.蛋白或核酸信号显现:
1). 用平头镊钳住膜片,垂直置于吸水纸上以吸去过量试剂,仅留下少量液体覆盖表面,不可让膜完全干燥;
2). 将膜片置于保鲜膜上,吸附蛋白面朝上,小心赶尽气泡;
3). 用电子装置感光,或在暗室中用X光片曝光;
4). 根据信号的强弱适