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Gibco胎牛血清白蛋白的提取步骤
发布时间:2018-06-19 02:56:17   [返回]
  Gibco胎牛血清在细胞培育中作为基础成长培育基的增加剂。常用血清是Gibco胎牛血清。Gibco胎牛血清是从合适人类卫生习惯的农场收集的。有时,也可能用其他的牛血清,如重生牛血清或许供体牛血清。在细胞培育中,血清供给了丰厚的高分子蛋白,低分子量养分物,疏水载体蛋白和其他体外细胞成长必要的成分如激素和粘附因子。一起,血清能够增加培育基的缓冲能力或中和有毒成分,起到维护细胞的作用。在细胞培育过程中是否选择增加血清,首要依据基础培育基化学成分,培育细胞的类型和培育体系而定。

Gibco胎牛血清白蛋白(BSA),是胎牛血清中的一种球蛋白,一般提取胎牛血清白蛋白,常常使用的办法是加热法。在今日的技术咨询中,为您首要介绍办法过程及所需资料。下面一起来看看是怎么提取Gibco胎牛血清白蛋白的!

一、所需资料

Gibco胎牛血清取近郊屠宰场,以柠檬酸三钠为抗凝剂,血液收集后随即分离出血浆备用。需求的试剂有血清白蛋白;溴甲酚氯;醋酸纤维素薄膜,其他试剂均为剖析纯。提Gibco胎牛血清白蛋白需求预备LG-6型大容量冷冻离心机,电泳仪,紫外可见分光光度计,酸度计。

二、具体办法

白蛋白含量测定选用溴甲酚氯法,以胎牛血清白蛋白为标准.白蛋白纯度的测定选用醋酸纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403nm处的光吸收值,然后折算成浓度为10g/L时牛血清白蛋白的光吸收值,用A403表明。

Gibco胎牛血清白蛋白的生产工艺:新鲜抗凝牛血用LC-6型大容量离心机(3000r/min×30min)离心分离出血浆,加一定量的蒸馏水稀释,再参加恰当的稳定剂和蛋白沉淀剂,然后按下述办法进行实验处理:

1.不同pH值溶液对白蛋白的收率和质量的影响,在其它条件固定的情况下,实验不同pH值对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。

2.不同加热保温时刻对白蛋白的收率和质量的影响,在选定的pH值和其它条件固定的情况下,实验不同加热保温时刻对Gibco胎牛血清白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。

3.不同稀释倍数对白蛋白的收率和质量的影响,在选定的pH值和保温时刻及其它条件固定的情况下,实验不同稀释倍数对Gibco胎牛血清白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。

4.不同加热温度对白蛋白的收率和质量的影响,在其它条件选定的情况下,实验不同加热温度对Gibco胎牛血清白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。

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