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Gibco胎牛血清的储存方法
发布时间:2018-06-21 02:10:10   [返回]
  Gibco胎牛血清保存办法

1、需要长时间保存的血清有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在 37℃放置太久,不然血清会变得浑浊,一同血清中的有效成分会被损坏,而影响血清质量。假如一次无法用完一瓶,可 将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。因为血清结冰时体积会添加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留一 定体积空间,不然易发作污染或玻璃瓶冻裂。

2、一般厂商供给的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清参加培养液内一同过滤,切勿直接 过滤血清。

3、瓶装血清冻结需选用逐步冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全 部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规矩摇晃均匀(当心勿构成气泡),使温度 与成分均一,削减沈淀的发作。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结,这样因温度改动太大,简单构成蛋白质凝聚而 呈现沉积。

4、热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全冻结的血清.加热过程中须规矩摇晃均匀.此热处理的意图是使血清中的补体 成分灭活.除非有必要,一般不建议作此热处理,因为热处理会构成血清沉积物明显增多,并且还会影响血清的质量.补体 参加反响有:细胞毒效果, 滑润肌细胞缩短, 肥大细胞和血小板开释组胺, 增强吞噬效果, 促进淋巴细胞和巨噬细胞 发作化学趋化和活化。

5、血清中的沉积物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻结后血清中纤维蛋白构成,这些絮状物不会影响血清自身 的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":通过热处理过的血清,沉积物 的构成会明显增多。有些沉积物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑 点不会影响细胞成长,但假如置疑血清质量,则应立即停止使用,替换另一批号的血清。

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