FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽-生化试剂-上海觅拓生物科技有限公司

生化试剂

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

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货号：	FS0382-300T/FS0382-1MG
保存条件：	-20C避光干燥
供应商：	上海觅拓生物
规格：	300T/1MG

规格：	300T	产品价格：	¥780.0
规格：	1MG	产品价格：	询价

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽F-actin 肌动蛋白( 聚合) ;G-actin 球开肌动蛋白( 单体) ;Actin Polymerization 肌动蛋白聚合Cytochalasin 细胞松弛素CASNO.; 17466-45-4 FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽
FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽
产品简介：

产品货号	产品名称	规格	价格（元）	促销价（元）
FS0381-300T	TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽	300T	780.00	550.00
FS0381-1MG	TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽	1mg	6500.00	询价
FS0382-300T	FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽	300T	780.00	550.00
FS0382-1MG	FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽	1mg	6500.00	询价
FS0383-1MG	Phalloidin 鬼笔环肽	1mg	5800.00	询价

【注】本品以冻干粉形式( Cat#FS0382-1MG) ,1mg包装适合用量多的研究者另提供溶于甲醇的储存液( 20puM) 形式( Cat#FS0382-300T ) ，300T包装，适合用量少的研究者;300T为液体即用型，1mg为冻干粉！
产品属性：
分子式（Molecular Formula）：C56H60N10O15S2
分子量（Molecular Weight）：1177.3
较大激发/发射波长（Ex/Em）：495~496/513~516nm
外观（Appearance）：黄色粉末（冻干粉）
溶解性（Solubility）：溶于DMSO、DMF、甲醇或者acetonitrile水溶液（20%）
  鬼笔环肽( Phalloidin) ,又称鬼笔鹅育素最初是以毒蘑菇鬼笔鹅育( Amanita phalloides) 中分离到的一种七肽毒素，以极高的亲和力和特异性结合肌动蛋白丝F-ctin(聚合开式的肌动蛋白) ,不会结合单体肌动蛋白( G-actin)。不像肌动蛋白抗体，同时识别单体和聚合开式的肌动蛋白。鬼笔环肽对大小纤维的亲和力相近，在许多不同的动植物物种的肌肉和非肌肉细胞中，基本都按照一个肌动蛋白亚基与一个鬼笔环肽分子的化学计量比结合。不像肌动蛋白抗体,对不同物种或来源的肌动蛋白亲和力会发生明显变化。鬼笔环肽的非特异性结合几乎可忽略染色和未染色的区域的差异极其明显。鬼笔环肽使得肌动蛋白聚合/解离的临界浓度降至1ug/ml ，可用作一种聚合增强剂。另外产生的复合物高度稳定( 解离常数约3x 10-8M) ，能够抑制细胞松弛素碘化钾和温度上升引起的去聚合和去组装舌性。
鬼笔环肽及其行生物在纳摩尔浓度即可对F-actin染色且水溶性良好是非常实用和方便的探针,对组织切片、细胞培养物或无细胞体系内的F-actin进行定性和定量研究。另外鬼笔环肽及其行生物很小直径约12-15 A ，分子量<2000 Da ，经标记后的F-actin仍维持许多标记前的功能。比如标记的甘油抽提肌纤维仍能收缩;标记的肌动蛋白丝仍能在固相肌球蛋白基质中移动。
本品为FITC标记的鬼笔环肽，染色反应特异性强，对比性高，具有比Actin抗体更好的染色效果，适合用作F-actin的定性和定量检测。另外，经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。

  产品应用
  1) 对固定的组织切片和组织细胞培养物进行肌动蛋白丝(F-actin )的荧光染色;
2) 体外制备稳定的荧光肌动蛋白丝( F-actin );
  保存与运输方法
  保存:-20C避光干燥保存2年有效。运输:冰袋运输。

  注意事项
  1) 本品具有一定的毒性、LD50=2mg /kg.操作时请主意防护。
  2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一欠性手套操作。

  操作流程(免疫荧光染色)
有几种方去都能用来染色组织细胞培养物内的肌动蛋白丝( F-actin) 染色其中，固定步骤在获得可信且具代表性的细胞F-actin分布情兄中至关重要。固定步骤基于实验自身需求来选择。多聚甲醛或戊二醛都能得到优秀的F-actin染色和良好的板状伪足维持保存。

  一、染色工作液准备
  1.1取低温保存的FITC-Phalloidin 冻干粉置于室温回温至少20min，低速离心后，加入甲醇或无水DMSO充分容解配制成20-100UM储存液。根据单次用量进行分装,置于-20C避光保存，一年稳定。[注意] :FITC- Phalloidin的分子量( Mw)以标签为准。
1.2正式实验前,使用1xPBS Buffer( pH 7.4) 稀释储存液到需要的工作浓度常用的工作浓度范围为80-200nM。可以100nM为起始工作浓度**的工作浓度请参考文献或根据实验室现有体系来摸索。
  [注1] :可使用含1% BSA的PBS Buffer稀释储存液，能够降低非特异背复染色,也能最小化鬼笔环肽粘附到管壁的可能性。
  [注2] :染色工作液现配现用室温避光保存。

  二、染色流程
  2.1细胞爬片培养,使其密度至少达半汇合。
  2.2 吸掉培养液用37C预热的1xPBS Buffer (pH 7.4 )清洗细胞2 次。
  2.3 用溶于PBS的4%多聚甲醛固定细胞室温固定10min。[注意] :固定过程中甲醇能破坏肌动蛋白，因此固定液中较好避免接触任何甲醇。较好的固定液是无甲醇的甲醛。
  2.4 用1x PBS Buffer清洗细胞2-3 次,室温下30S/ 次。
  2.5 用破膜缓冲液透化细胞室温处理5min。
  2.6 用1x PBS Buffer清先细胞2-3.次室温下30S/次。
  2.7 取200UI现配的FITC-Phallodin染色工作液,完全要盖盖玻片上的细胞窒温避光孵育30min。[注意] :通常情况49C-370C都适合用于染色。为了避免工作液的挥发孵育过程将盖玻片置于一密封的容器内。
  2.8 用1> PBS Buffer清先细胞2-3 次,室温下30S/ 次。
  2.9 取200ul DAPI 溶液(100nM )或商业化的即用型DAPI染色液对细胞核复染室温约30S。
  2.10 用1x PBS Buffer清先细胞1-2 次室温下30S/次。
  2.11将盖玻片倒置在滴有一滴抗荧光淬灭剂(如Fluoromount-GTM ,Cat# FSM0032-5ML)的裁玻片上。用纸巾轻轻吸掉多余淬灭剂,然后用透明指甲油密封盖玻片四周。将此去劫处理玻片置于4.C避光存放至少6个月仍能维持F-actin染色。
  [可选] :完成步骤3.8后直接将盖玻片倒置在含DAPI的抗荧光淬灭剂( 如DAPIFluoromount-GTM Cat# FSM0033-5ML) 的载玻片上。然后吸掉多余淬灭剂并用指甲油密封盖玻片四周
  2.12 荧光显微镜下观察染色结果选择TRITC激发/发射滤片(Ex/Em= :546/575nm) 和DAPI激发/发射滤片(Ex/Em= 364/454nm)。

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TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

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