Imject™ mcKLH(在 PBS 中)
Thermo Scientific Imject 海水养殖 KLH 是一种纯化钥孔戚血蓝蛋白载体蛋白,可通过肽抗原简单制备高效免疫原。
Imject 海水养殖 KLH 的特点:
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高得率结合—KLH 的每个分子包含数百种伯胺,可用于通过 EDC 或 NHS 酯交联剂结合半抗原
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质量经过验证—与载体蛋白的传统来源不同,纯化和稳定海水养殖 KLH 可保持水溶液中的溶解度
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可持续来源— KLH 是从在海水养殖环境中生长的软体动物
大锁孔帽贝(钥孔帽贝)的选定种群中收获的,而不是从野生种群中提取
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高免疫原性—KLH 具有高分子质量(4.5 x 10
5 至 1.3 x 10
7 道尔顿,350 和 390 kDa 亚单元的聚集体),可引发比 BSA 或卵清蛋白更强的免疫应答
KLH 是用于制备肽抗原以用于免疫接种和抗体产生的较常用和免疫原性载体蛋白。在磷酸盐缓冲液中的 KLH 制剂可随时用于通过胺反应性 NHS 酯或Glutaric dialdehyde交联反应实现的半抗原-载体结合。MES 缓冲液制剂对采用羧基反应性碳二亚胺交联剂 EDC(或称 EDAC)的肽-载体结合进行了优化。
载体蛋白是能够在注射后刺激免疫应答的大型复杂分子。成功的生产特异针对小抗原的抗体(即肽段或药物化合物)要求这些半抗原被共价结合于更大、更复杂的分子(通常为某种蛋白质)上,以使其具有免疫原性。基于免疫原性、溶解度以及是否能够达到与载体的充分结合选择载体蛋白。
出于抗体产生的目的,钥孔戚血蓝蛋白 (KLH) 广泛用作与半抗原和其他抗原结合的载体蛋白,使其更具免疫原性。由于其质量大、复杂性高,与其他载体蛋白相比,KLH 能够引发更强的免疫应答。因为此蛋白来源于软体动物,它在系统发育上远离哺乳动物物种,在测定过程中产生会与典型目标样品发生交叉反应的抗体的可能性较小。
Imject 海水养殖 KLH (mcKLH) 是指在海水养殖环境中生长(而不是从野生环境中捕获)的帽贝中收获的 KLH。Imject mcKLH 具有尽可能高的免疫原性;经过纯化并于缓冲液中冻干以优化其稳定性和溶解度以进行半抗原结合。作为一种大蛋白,KLH 具有数百个伯胺和羧基,这些基团可专门用于与NHS 酯、EDC 和其他交联试剂的结合。
碳二亚胺交联剂
EDC 将含羧基半抗原(例如,肽抗原的 C 端)与高免疫原性 KLH 载体蛋白结合,用于免疫和抗体产生。这种免疫原制备的方法非常适用于一级序列中央区域含有较少或不含天冬氨酸残基、谷氨酸残基(羧酸盐)和赖氨酸残基(伯胺)的肽抗原。由于肽含有羧酸盐和胺,EDC 结合可使其形成各种聚合物,并在交联的载体蛋白上呈随机取向。通常情况下,这样可令载体蛋白上呈现高水平的抗原上样量,并且各个方向上均可诱导抗体产生。不过,抗原肽序列内的重要(所需的)抗原决定簇如果含有伯胺(赖氨酸残基)或羧酸盐(天冬氨酸和谷氨酸残基),该表位可能被 EDC 介导的结合所封闭。在这些情况下,可以使用同源双官能团胺-反应性交联剂与磷酸盐缓冲液纯化蓝载体,或用独特的末端半胱氨酸合成肽以及马来酰亚胺活化的蓝载体试剂盒来制备载体蛋白偶联物。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.