样本密度分离液
|
货号：
|
7912011
|
|
供应商：
|
上海觅拓
|
|
数量：
|
10
|
|
规格：
|
250ml
|
【产品名称】
通用名称：样本密度分离液英文名称：Density Reagent
【型号】
样本密度分离液（A 型） 样本密度分离液（B 型）
【规格】
100mL/瓶、250mL/瓶
【预期用途】
通过密度分离作用，用于样本中不同成分的分离，以便于对样本的进一步分析。
【检验原理】
外周血中单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同，介于 1.075～1.090g/ml 之间，红细胞及粒细胞的密度较大，为 1.092g/ml 左右， 血小板在 1.030～1.035g/ml 之间。因此利用样本密度分离液产生一定程度的密度梯度， 将稀释后的全血平铺于分离液之上。离心后，红细胞、粒细胞比重大，沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分离液比重，漂浮于分离液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分离液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。
【主要组成成分】
本产品的主要成份为聚蔗糖和泛影酸。
【储存条件及有效期】
未开封室温避光保存，有效期为 2 年；开封后 4℃保存，保质期为 6 个月。
【样本要求】
要求血液为新鲜的抗凝血，血液收集时应无菌操作且在储存、运输、处理过程中避免冷冻。
【检验方法】
-
取新鲜抗凝（EDTA、枸橼酸钠或肝素等抗凝剂均可）全血，用等体积等渗溶液
（PBS 或生理盐水）稀释全血。
-
在离心管中加入一定体积的分离液，将稀释后的血样平铺到分离液液面上方， 保持两液面界面清晰。分离液、抗凝未经稀释全血、等渗溶液（PBS 或生理盐水）体积为 1:1:1。
3. 室温，水平转子 700-800g（2000-2500rpm）离心 20-30min。
-
离心结束后，管底是红细胞，中间层是分离液，最上层是血浆/组织匀浆层，血浆层与分离液层之间是一层薄较致密的白膜，即：单个核细胞（包括淋巴细胞和单核细胞）层。小心吸取白膜层到另一离心管中。
-
用等渗溶液（PBS、生理盐水或培养基等）稀释到一定体积，颠倒混匀。室温， 水平转子250g（1000rpm），离心 10min 弃上清。重复洗涤 1-2 次。
-
用等渗溶液（PBS、生理盐水或培养基等）将细胞重悬计数备用。
【检验结果的解释】
分离正常人外周血，每毫升全血可获得的单个核细胞数应≥0.5×106。
【检验方法的局限性】
本产品的效果受储存条件、操作者的经验、样本质量等因素影响。
【产品性能指标】
本产品外观略带黄色透明液体，无沉淀、颗粒或絮状物； 密度：1.077±0.001g/mL；
渗透压：280-340mOsmol/kg；
内毒素要求：样本密度分离液（A 型）＜0.06EU/mL 样本密度分离液（B 型）＜0.5EU/mL
无菌要求：无微生物检出
【注意事项】
-
本品应由专业人员使用，使用前应仔细阅读说明书，并做好个人卫生防护；
-
整个实验注意无菌操作；
-
从新鲜血样中分离细胞时，洗涤两到三次，避免分离液或血细胞、血小板的干扰；
-
混匀细胞时，请尽量吹打混匀，避免细胞成团；
-
试剂储存时，避免高温、低温环境及日光照射；试剂使用时请注意无菌操作；
-
本产品仅供体外诊断用；
-
有效期内使用；
-
废液的处理应按国家或其他相关规定进行。
【参考文献】
-
Boyum A.. Scand J. Clin. Lab. Invest. 1968; 21, Suppl. 97.
-
Harris R. & Ukayiofo EV. Lancet. 1969; 327: 7615.
